Расшифровка анализа: что такое антитела, их функции и показания

Расшифровка анализа: что такое антитела, их функции и показания

Еще недавно только врачам было известно, как перевести показатели анализов на антитела в общедоступные категории – «заболел», «переболел», «не встречался с инфекцией Sars-CoV-2». Теперь эта задача под силу каждому пациенту, и остается лишь разъяснить, как правильно расшифровать полученные результаты.

2 вида анализов

Тесты на антитела к коронавирусу проводят в двух вариантах – качественном и количественном. Ускоренные экспресс-анализы бывают только качественными, то есть они показывают сам факт наличия глобулинов в крови, без определения их концентрации.

Количественное значение получают посредством иммуноферментной методики исследования, на специальном оборудовании. Такие анализы обозначаются как ИФА.

Быстрые, или ранние антитела

Это иммуноглобулины lgM, которые начинают вырабатываться иммунными клетками почти сразу после попадания инфекции в организм. Они представляют первую линию защиты и активизируются в течение 3-4 дней. В дальнейшем их сменяют поздние, или медленные антитела.

Число lgM достаточно быстро растет и достигает максимума в острой стадии Covid-19, которая приходится чаще всего на 2-3 неделю после заражения. В крови глобулины данного типа сохраняются сравнительно недолго, до месяца или немногим дольше.

Подробнее об антителах lgM читайте здесь.

Внимание !
Обнаруженные lgM у человека свидетельствуют об инфицировании. Если симптомов нет, то болезнь либо протекает в бессимптомной форме, либо ее признаки появятся в ближайшие дни.

Антитела lgA

Антитела lgA также вырабатываются в начале болезни и могут присутствовать в крови до 3-х недель после выздоровления. Это более специфичный признак текущего или недавно перенесенного Covid-19, по сравнению с lgM.

Если есть подозрение на инфекцию, протекающую в данный момент или перенесенную в течение предшествующих 60 дней, целесообразно сдать комплексный анализ на lgA и lgM.

Антитела типа А находятся преимущественно на слизистых дыхательных путей, органов пищеварительной и мочеполовой системы. То есть в местах, где патогенным микробам и вирусам проще всего попасть в организм.

В задачу данного класса антител входит связывание между собой враждебных частиц с целью предотвращения их прикрепления к поверхности слизистых. Доля lgA составляет до 20% от всех имеющихся глобулинов у взрослых.

Медленные, или поздние антитела

Иммуноглобулины lgG синтезируются спустя примерно 2 недели после встречи с вирусом, но остаются в крови намного дольше, чем lgM. Именно они формируют долгосрочный иммунитет и говорят о перенесенном заболевании.

Сколько времени сохраняются антитела в крови, и от чего это зависит, мы написали тут.

Интерпретация результатов

ПЦР-тестlgMlgGРасшифровка
Вирус отсутствует
+Начальная стадия заражения, возможно бессимптомное течение
++
+++Острая фаза, пик болезни;стадия выздоровления;прошло 2-3 недели после инфицирования
++
+Фаза выздоровления;Перенесенная недавно инфекция, в течение последних 3-х недель

Тест на антитела lgA целесообразно сдавать, если есть подозрение на бессимптомное течение болезни в настоящий момент или недавно перенесенную инфекцию. В последнем случае со времени выздоровления должно пройти хотя бы 2 недели.

Обнаружение антител типа А может быть признаком как текущего, так и недавно перенесенного заболевания. Для подтверждения текущей инфекции следует сдать мазок на коронавирус.

При сдаче комплексного анализа на антитела lgA и lgG результаты могут быть 2-х видов:

  • Выявление только антител А при отсутствии иммуноглобулинов G говорит в пользу того, что человек болеет сейчас.
  • Наличие антител обоих типов означает, что инфекция уже покинула организм, и пациент здоров.

Если проводился количественный анализ, то положительным является результат lgA>1.1. Пограничные цифры – lgA=0.8-1.1 – требуют повторного исследования, поскольку, если это ранняя стадия, антитела могли еще не выработаться в достаточном количестве.

В подтверждение заболевания имеются характерные симптомы, и нужно подтвердить диагноз, сдав мазок из носоглотки. При положительном результате уровень антител А поднимется спустя 2 недели.

Внимание !
lgA – это самый ранний показатель, который считается более точным, чем lgM, что объясняется его большей специфичностью.

Анализ на антитела lgA может давать отрицательный результат, когда коэффициент меньше 0.8. Значит, антител данного типа нет, потому что контакта с вирусом не было, или идет самое начало болезни, и иммунный ответ появится позже. При наличии симптомов коронавируса необходимо сдать ПЦР-тест.

Полуколичественные тесты: референсные значения

  • lgM
  • lgM=1-2, lgG
  • lgM≥2, lgG
  • lgM
  • lgM≥1, lgM≥10. Результат сомнительный: коронавирус может оставаться в крови или уже покинуть организм. Лучшее решение – повторить тест через неделю.

Внимание !
Расшифровка антител к коронавирусу в соответствии с указанными значениями рекомендована московским Департаментом здравоохранения.

Сколько должно быть антител у людей: нормы

Антитела, lgДоля от общего числа глобулинов, %Концентрация в сыворотке крови, мг/млПериод жизни, днейСкорость выработки, мг/кг в деньФункции
A153.56-724Отвечает за местный иммунитет, препятствует распространению инфекционных агентов
M5-101.556.6Первичная иммунная реакция, защита на начальных стадиях заражения
G8013-1421-2433Формирование гуморального иммунитета, нейтрализация патогенов, стимуляция фагоцитоза,
D0.250.0330.4Участие в активизации иммунного ответа
E0.00220.016Защита от паразитов и аллергии

Какое количество антител считать достаточным

Ответ здесь очень простой – lgG больше референсного значения свидетельствует о перенесенном заболевании и наличии иммунитета к коронавирусной инфекции. Это значение при Sars-CoV-2 составляет 10.0.

Присутствие в крови антител типа G означает, что иммунные клетки распознали вирус, и запущен процесс реагирования. Цифровой параметр показывает, насколько выражен иммунный ответ. Референсные значения получают путем массового тестирования здорового населения.

В подавляющем большинстве российских тест-систем, использующих методику ИФА и ИХЛА – иммуноферментного и иммунохемилюминесцентного анализа – референсные значения lgG составляют 10.00. Но есть и такие, где они равны 2.5.

Внимание !
При сдаче теста лучше уточнить, каково референтное значение, чтобы не ошибиться в расшифровке.

Таким образом, количество антител считается хорошим, если оно выше или равно референтным показателям.

Интерпретация количественных тестов lgG:

Содержание, ОЕ/мл0-1212-15≥15
РезультатОтрицательноСомнительноПоложительно
РасшифровкаАнтител нет или их уровень ниже определимого. Такой результат может быть у больного человека, когда вирус находится в периоде инкубации, или идет ранняя стадия болезниНизкий уровень антител, рекомендован повторный анализ через 1-2 неделиВысокая концентрация защитных антител

Максимальное значение уровня антител типа G – это показатель высокой стойкости иммунитета. Если он больше 15, можно говорить о некоторой защищенности от повторного заражения. Однако связь между данными параметрами достоверно еще не установлена, и как долго продлится эта защита, сказать нельзя.

При lgG больше 100 можно даже стать донором плазмы и отдать свою кровь тяжелобольным ковидным пациентам. В некоторых лабораториях этот порог еще ниже и составляет lgG=40.

Где сдать тест

Провериться на наличие антител можно в частных медицинских лабораториях Гемотест, Диалайн, Инвитро, Хеликс, CMD, Медси и пр. Нужно просто позвонить по многоканальному телефону, указанному на сайте и узнать, где расположен ближайший офис.

В ближайшее время планируется запустить массовое тестирование с помощью тест-систем от Государственного научного вирусологического центра Вектор. Цена анализов – от 600 до 1900 руб.

При желании можно сделать экспресс-тест по ускоренной методике. Результат будет менее точным, но более быстрым. Его получают через несколько часов или несколько минут, в зависимости от типа прибора.

Если используется пластиковая панель, то в ее окошко капают каплю крови, и рядом высвечивается 1,2 или 3 полоски:

  • 1 – антител нет;
  • 2 – активная стадия болезни;
  • 3 – выздоровление.

Такие экспресс-тесты могут проводиться вне лабораторных условий – на дому, в кабинете врача, в аэропорту и других местах. Более фундаментальные исследования требуют забора крови из вены и анализа иммуноферментным методом ИФА – к образцу добавляются окрашенные антигены, которые при соединении с антителами меняют его цвет.

Для выполнения количественного анализа и установления скорости выработки антител кровь разбавляется физраствором, часть смеси выливают в пробирку с реактивом. Затем осуществляют подбор концентрации с помощью постепенного разведения смеси до тех пор, пока не будет видна реакция.

Советы, как правильно подготовиться к исследованию

Совет №1

За 2-3 часа до сдачи крови исключается прием пищи, но можно пить негазированную воду.

Совет №2

За полчаса до процедуры желательно не курить.

Совет №3

Даже при выявлении антител lgG «расслабляться» не стоит, так как связь между их наличием и формированием стойкого иммунитета к коронавирусу не установлена до конца. Нужно продолжать носить маску и соблюдать общепринятые меры предосторожности.

Совет №4

Нельзя идти сдавать анализ при простуде, так как признаки ОРВИ являются противопоказанием к исследованию.

Совет №5

Иммуноглобулины типа M могут обнаруживаться раньше, чем инфекция размножится в достаточном количестве, чтобы ее выявил ПЦР-тест. А также до того, как появятся антитела lgG. То есть по данному показателю можно поставить предварительный диагноз в периоды, когда диагностика затруднена.

Совет №6

Оценка результатов исследования крови на антитела возможна только с учетом показателей мазка ПЦР.

Совет №7

Если результат пограничный и вызывает сомнения, то анализ рекомендуется пересдать примерно через неделю.

Часто задаваемые вопросы

Может ли не быть антител, если переболел коронавирусом?
Здесь нет и не может быть точного ответа, так как коронавирусная инфекция еще изучена недостаточно, и статистических данных мало, а те, что есть, порой противоречивы и непостоянны.

Тем не менее, отсутствие антител после Covid-19 вполне допускается в силу нескольких причин, к которым относятся:

  • ошибочный диагноз «коронавирус» изначально. Подобная ситуация не редкость;
  • ошибка самого теста на антитела, который просто не сработал;
  • низкий иммунный статус пациента, например, при СПИДе: человек справился с инфекцией, но слабый иммунитет не «запомнил» возбудителя и не выработал достаточно антител;
  • иммунитет к Covid-19 сформировался, но только на время болезни. После победы над ней синтез защитных глобулинов прекратился за ненадобностью.

Что может повлиять на результат анализа?
Исследование может показать отсутствие lgM при его наличии в период так называемого «серологического окна» – между 5-7 и 10-14 днем при вялотекущем заболевании. При этом тест ПЦР также даст отрицательный ответ, поскольку вирус еще не размножился до выявляемого уровня.

Бывает и наоборот, когда анализы показывают присутствие lgM, а на самом деле в крови Ковида нет. Такой результат возможен у пациентов, страдающих системной красной волчанкой, тиреоидитом и другими аутоиммунными патологиями, а также ВИЧ-инфекцией.

Что означает наличие антител в крови

  • О чем можно судить по антителам
  • Разновидности антител
  • Как сдать анализ крови на АТ
  • Антитела при беременности
  • Антитела на лямблии
  • Антитела к гельминтам
  • Антитела к бактерии Helicobacter pylori
  • Антитела в диагностике гепатита С
  • Использование в диагностике туберкулеза

Антитела в крови (АТ) вырабатываются в ответ на вторжение в организм чужеродных веществ. Они формируются из лимфоцитов в качестве защитной реакции. Значит по их содержанию мы можем судить о степени выраженности иммунитета. Поскольку образование антител требует времени, то имеет значение скорость достижения определенного уровня.

У человека за разные периоды жизни случаются «встречи» с различными химическими веществами (бытовая химия, лекарства), возбудителями заболеваний, продуктами распада собственных тканей (при ранениях, любом воспалении).

Вопрос о том, насколько оправдана массивная иммунизация, уже много лет делит ученых на два лагеря. Большинство все-таки считают, что проведение прививочной работы среди детей по строгому графику и в соответствии с показаниями пока следует продолжить, так как слишком высока распространенность инфекции.

Не зря антитела на конкретные белковые соединения при разных заболеваниях называют маркерами болезни.

О чем можно судить по антителам

Развитие иммунологии показало, что антитела можно различать не только по степени накопления, но и по виду. Выделено пять главных разновидностей, которые реагируют на определенные микроорганизмы и посторонние вещества и на продукты их распада. Поэтому исследование крови на антитела может помочь ответить на вопросы:

  • имеются ли в организме конкретные бактерии, вирусы;
  • если имеются, то в каком количестве (считать ли человека зараженным или это просто защита);
  • насколько полноценно отвечает собственный иммунитет на инфекцию, нужны ли дополнительные лекарственные средства;
  • во время инфекционного заболевания можно определить стадию болезни, прогнозировать исход;
  • есть ли у человека в крови антитела-маркеры к злокачественным клеткам при подозрении на онкологические заболевания;
  • как материнский организм реагирует на плод;
  • насколько бурно протекает процесс приживания пересаженного органа или тканей после трансплантации;
  • какой антиген вызывает аллергию.

Возможности по использованию в диагностике определения антител продолжают изучаться. До сих пор не ясно, почему при одинаковых условиях один человек остро переносит болезнь, а другой справляется самостоятельно без всяких симптомов.

Разновидности антител

В иммунологических лабораториях определяют 5 видов антител, они названы IgA, IgE, IgM, IgG, IgD. Каждый имеет сродство к определенным антигенам.

  • IgA — изучают при заболеваниях с поражением слизистых оболочек и кожи (при респираторных инфекциях, хронических кожных болезнях), поражении печени (при гепатитах, циррозе, алкоголизме);
  • IgE — класс указывает на защиту от распространенных инфекций, процесс обезвреживания токсинов, иммунитет плода при беременности;
  • IgM — антитела быстрого реагирования, они отвечают за первую встречу с чужеродным агентом;
  • IgG — обеспечивают длительную защитную реакцию, стойкий иммунитет;
  • IgD — этот класс мало изучен.

Как сдать анализ крови на АТ

Чтобы получить достоверную информацию, нужно правильно подготовиться и сдать кровь на антитела.

  1. За 2-3 дня до этого необходимо исключить из пищи все жареное, соленое и жирное, кофе и газированную воду, алкоголь в любом виде (это касается и пива).
  2. Если пациент недавно перенес острое заболевание или лечится медикаментами, то врач определит оптимальный режим перед сдачей крови.
  3. За сутки нужно прекратить физические упражнения. Не проводить физиотерапевтических процедур.
  4. В процедурный кабинет следует приходить утром до завтрака, натощак. Кровь берется из вены в локтевом сгибе, лучше позаботиться о соответственной одежде со свободными рукавами.

Норма и расшифровка анализа показана в таблице

Класс АТНормы в г/лПовышениеСнижение
IgAдля детей – 0,16-2,6
для взрослых – 0,35-3,55
туберкулез, болезни печени, муковисцидоз, ревматоидный артрит, нагноительные процессы в желудке и кишечникепоследствия приема медикаментов, облучение, дерматиты, злокачественное малокровие
IgGдля детей – 7,4-13,6
для взрослых – 7,8-18,5
туберкулез, ревматоидный артрит, волчанка, саркоидоз, ВИЧ-инфицированиеаллергия, мышечная дистрофия, злокачественные опухоли
IgMдля детей – 0,7-1,4
для взрослых мужчин – 0,5-2,4;
для женщин – 0,8-2,9
острые и хронические болезни пищеварения, органов дыхания, ожоги, паразитарные инфекции, внутриутробное инфицирование плода, лимфома

Направление на анализ дает лечащий врач, в нем он нацеливает лаборантов на причину диагностики. Рассмотрим конкретные практические показания и результаты.

Антитела при беременности

Резус-конфликт

При беременности особенно относятся к женщинам с резус-отрицательной кровью. Обязательно проверяют резус-принадлежность отца ребенка. Если он положителен, то плод может выбрать отцовские гены. Это означает бурную реакцию отторжения, называемую резус-конфликтом: материнский организм принимает ткани ребенка за чужеродные и борется против них.

Наиболее опасна подобная ситуация при повторных беременностях, когда у матери уже накопились антитела (даже если она делала аборт). В результате наступает отслоение плаценты и выкидыш. Исследование на АТ проводится для определения показаний к введению иммуноглобулина, способного задержать отторжение и уничтожить ненужные антитела.

Читайте также:  Сосудистые звездочки на лице и теле: причины появления и методы лечения

Выявление краснухи

Краснуха — инфекционное заболевание, которое очень опасно для женщины во время беременности из-за вреда будущему ребенку. Вирус нарушает формирование органов плода, вызывает опасные пороки развития. Поэтому лучше всего проверить анализ при планировании беременности и сделать прививку.

Когда женщина становится на учет, ей назначается общий анализ на антитела не только к краснухе, но и токсоплазмозу, герпесу, хламидиям, цитомегаловирусу (torch). Выявление положительного результата позволяет пролечить женщину в ранние сроки.

Результат «IgM –, IgG +» указывает, что женщина уже переболела или имеет достаточный иммунитет. Если «IgM+», то показатель опасен, это означает, что беременная больна в течении последних двух месяцев.

При выявлении антител к краснухе в ранние сроки акушеры рекомендуют аборт по медицинским показаниям. В противном случае женщине придется опасаться за здоровье ребенка.

Антитела на лямблии

Проведение исследования крови на антитела к лямблиям не считается основным способом выявления этого вида паразитов. Дело в том, что анализ будет положительным длительное время после курса лечения. Ответа на вопрос о том, болен ли человек сейчас, он не дает.

В клинике удобнее пользоваться определением лямблий в кале, в содержимом двенадцатиперстной кишки, в желчи. Эти способы дают несомненный результат. Повторение анализа три раза подряд с трехдневными промежутками повышает достоверность выявления до 90%.

Антитела к гельминтам

Существуют заболевания, когда в кале яйца глистов обнаружить практически невозможно. Единственным способом диагностики становится определение специфических антител к гельминтам. Исследование проводят для выявления трихинелл, аскарид, эхинококков.

При гельминтозах заражение происходит путем поступления с пищей недостаточно обработанного мяса и мясных изделий. Личинки глистов распространяются по всему организму, проникают в печень, мышцы, легочную ткань. У пациента обнаруживают высокую температуру, болезненность в мышцах, кашель.

Анализ на антитела будет повышенным через две недели после предполагаемого срока заражения. Поэтому, если первое исследование дало отрицательный результат, то повторить его нужно спустя 2-3 недели.

Антитела к бактерии Helicobacter pylori

Хеликобактер содержится «на правах постоянного проживания» в желудке и двенадцатиперстной кишке у 70% взрослого населения. Как только появляются нарушения в питании, учащаются стрессовые ситуации, происходит прием алкоголя, инфекция активизируется и становится возбудителем воспалительного процесса от простого гастрита до язвенной болезни. Длительное поражающее действие бактерии провоцирует развитие раковой опухоли.

Анализ проводят при наличии симптомов нарушения пищеварения (боли, непереносимость пищи, тошнота, изжога), для оценки эффективности проведенного лечения, в качестве профилактики язвенной болезни.

О наличии Хеликобактер говорит сочетание трех классов антител:

  • IgA и IgM обнаруживается уже в ранних стадиях заражения;
  • IgG появляется только через месяц, поэтому, если в первых анализах результат отрицательный, то это пока ни о чем не говорит, следует повторить его через четыре недели.

Антитела в диагностике гепатита С

Диагностика гепатита С по антителам не ограничивается только перечисленными видами. Вирус гепатита способен давать ложные результаты. Поэтому проводится одновременно выявление АТ к белкам типа NS-3 и NS-4.

  • Обнаружение типа IgG указывает на перенесенный острый вирусный гепатит или переход в хроническую форму.
  • IgM говорит об активном остром процессе в печени.

Отличия подтверждаются с помощью антител NS-3 (за острую фазу) и NS-4 (более характерно хроническое течение).

Использование в диагностике туберкулеза

Диагноз туберкулеза легких ставится на основании видимых на рентгенограммах типичных изменений ткани. Гораздо сложнее выявить туберкулез внелегочных форм. Ведь он проявится только после разрушения, например, почек или костей.

Задача диагностики — обнаружить туберкулез в начальной стадии, чтобы увеличить результативность лечения, избежать признаков устойчивости к терапии. В этом значительную помощь оказывают реакции на антитела.

Тест на пробу Манту с внутрикожным введением туберкулина — самый применяемый способ, основанный на визуальной кожной аллергической реакции на введение туберкулина.

Положительная проба не обязательно указывает на болезнь, она служит показателем хорошего иммунитета на введенную ранее вакцину. Фтизиатры учитывают только нарастание результата.

Биомаркерами туберкулезной инфекции являются классы антител IgM и IgG. Метод используется в массовых обследованиях населения. При выявлении повышенного уровня у детей и взрослых далее можно обследовать рентгенологически, проверять наличие микобактерий в мокроте, моче.

Современная медицина продолжает поиски рациональной диагностики заболеваний. Недавно опубликованы результаты обнаружения биомаркеров для диагностики сотрясения мозга. Проводили обследование хоккеистов из Швеции.

Показатели держатся на повышенном уровне в крови пострадавшего до шести дней. В исследовании уже заинтересовались специалисты спортивной медицины, где вопрос о допуске к соревнованиям после травм очень спорный, особенно в боксе. А для нейрохирургии это «подарок». Ведь приходится ориентироваться только на жалобы пациента.

Определение группы крови

Определение группы крови – процедура, в ходе которой анализируют антигены – белки, входящие в состав эритроцитов, красных кровяных телец. Существует несколько разновидностей антигенов и вырабатываемых ими антител, исходя из чего каждого человека, в зависимости от состава его эритроцитов, можно причислить к определенной группе крови.

Вы можете пройти определение группы крови и резус-фактора в Поликлинике Отрадное. Срок готовности результатов анализа – от одного дня. Если у вас нет времени, чтобы приехать в клинику, сдать кровь для исследования вы можете и на дому: к вам выедет медсестра.

Наличие данных о собственной группе крови в критической ситуации, когда счет идет на минуты, может спасти человеку жизнь. Если такой информации нет, то врачам, перед переливанием крови придется дополнительно тратить время на исследование. Поэтому каждому пациенту рекомендуется сдать анализ на определение группы крови и всегда носить распечатку результатов исследования с собой: например, в кошельке, рядом с другими важными документами.

Определение группы крови и резус-фактора

Сейчас существует более 30 разных подходов к определению групп крови. В зависимости от используемой системы, количество групп крови может быть разным: системы Келл, Кид и Даффи выделяют 3, а MNSs – 9. И все же наиболее распространенными являются две системы:

  1. AB0 (А, Б, ноль);
  2. Резус-фактор.

Система AB0 выделяет 4 группы крови и подразумевает исследование 3 видов антигенов – A, B и H. Однако в результатах анализов H принято заменять на 0 (что говорит об отсутствии в эритроцитах антигенов A и B). Буквы дополняют цифрами – I, II, III или IV. Именно поэтому сами пациенты часто говорят о своей группе крови не в буквенном, а цифровом обозначении – первая, вторая, третья или четвертая. В ходе анализа учитывается не только присутствие/отсутствие в эритроцитах антигенов, но также и наличие в плазме крови агглютининов. Это специфические белки, антитела, атакующие «чужеродные» эритроциты. Если пациенту перелить кровь группы с не подходящими ему антигенами, агглютинины уничтожат содержащие их эритроциты.

По системе AB0 выделяют следующие группы крови:

  • 0 (I) – антигены A и B отсутствуют, выявлены антитела α и β.
  • А (II) – присутствуют антиген А и антитело β.
  • B (III) – в наличии антиген B и антитело α.
  • AB (IV) – выявлены антигены A и B, антител нет.

Система Rh (резус-фактор) подразумевает анализ антигена D – специфического белка крови, присутствующего или отсутствующего на поверхности эритроцитов. Резус-фактор будет положительным (обозначается как Rh+) при наличии антигена. При отсутствии этого белка — он отрицателен (Rh-).

Резус-фактор имеет значение лишь в 2 ситуациях:

  • При переливании крови. Если в организм пациента попадает кровь с иным резус-фактором, способен возникнуть резус-конфликт. Это может привести к гемотрансфузионному шоку – редкому, но серьезному осложнению, которое выражается в значительном ухудшении самочувствия пациента, снижении артериального давления, затруднении дыхания. Иногда происходит нарушение функций сердца, печени или почек, что может стать причиной летального исхода. Резус-отрицательным людям переливают кровь исключительно с отрицательным резусом. Пациентам с положительным резус-фактором при отсутствии альтернативы можно перелить до 500 мл резус-отрицательной крови.
  • При планировании беременности. Если у матери Rh отрицательный, а у отца – положительный, и ребенок унаследовал резус-фактор мужчины, при беременности может развиться резус-конфликт. Организм матери начинает воспринимать плод как «чужеродное тело» и атакует его эритроциты. В итоге ребенок испытывает кислородное голодание, может также произойти самопроизвольный аборт. Врачи способны предотвратить данные последствия и обеспечить нормальное течение беременности и рождение здорового малыша. Но для этого необходимо заранее (желательно еще до зачатия) узнать резус-факторы потенциальных матери и отца. При положительном Rh у матери опасности возникновения резус-конфликта нет, вне зависимости от резус-фактора отца.

Определение группы крови обычно подразумевает применение обеих систем: ABO и Rh.

Показания к исследованию

Анализ на определение группы крови осуществляется:

  • По желанию пациента (если он хочет на всякий случай знать свою группу крови).
  • Перед плановыми операциями, предполагающими кровопотери.
  • Для людей, деятельность которых связана с риском получения тяжелых травм (например, военных, спасателей, пожарных).
  • При планировании беременности – во избежание резус-конфликта.
  • Ежемесячно во время беременности (после 32 недели чаще), если ранее было выяснено, что у женщины отрицательный Rh, а у мужчины – положительный. При выявлении отклонений от нормы будет назначено лечение.
  • Для новорожденного ребенка, если у его матери отрицательный резус-фактор, а у отца положительный, даже если во время беременности не возникало проблем.

При наличии у малыша положительного Rh для профилактики резус-конфликта во время последующей беременности женщине в первые трое суток после родов вводят антирезусный иммуноглобулин.

  • Для новорожденного при наличии признаков гемолитической болезни – состояния, обусловленного несовместимостью Rh матери и ребенка. Симптомами патологии являются желтуха, анемия, отеки. Выявляется гемолитическая болезнь еще во внутриутробный период.

Важно! Резус-конфликт редко возникает при первой беременности, обычно – при последующих. Это объясняется тем, что иммунная система женщины сталкивается с «чужеродным» антигеном впервые, и не успевает дать сильный ответ, но «запоминает угрозу». В следующий раз она уже отреагирует гораздо агрессивнее. Однако определение группы крови и резус-фактора необходимо проводить и перед первой беременностью. Введение антирезусного препарата после первых родов позволит избежать осложнений последующих беременностей.

Экстренно определение группы крови требуется перед переливанием крови в следующих случаях:

  • при тяжелых анемиях;
  • при кровотечениях (маточных, желудочно-кишечных, легочных);
  • при внеплановых хирургических вмешательствах;
  • при серьезных травмах, связанных с потерей большого количества крови.

Подготовка к исследованию

Специфических подготовительных мер не требуется. Однако принимать пищу рекомендуется не позднее чем за 4 часа до забора крови. Также накануне процедуры следует исключить чрезмерные физические нагрузки. Лучше прийти в клинику заблаговременно и до сдачи крови в течение 10-15 минут спокойно посидеть.

Так как на результаты исследования могут оказывать влияние некоторые заболевания, прием ряда лекарств, особенности питания и даже эмоциональное состояние пациента, анализ рекомендуется во избежание получения недостоверных результатов проводить два раза. Следует заранее предоставить врачу список всех принимаемых медикаментов.

Методы определения группы крови

В настоящее время существуют 3 основных метода определения группы крови, соответствующие системе AB0:

  • Определение группы крови стандартными сыворотками.
  • Метод перекрестной реакции.
  • Определение группы крови цоликлонами.

Кровь для исследования обычно берется из вены, иногда из пальца.

Стандартный метод

Определение группы крови по стандартным сывороткам – наиболее простой и распространенный метод. Используемые сыворотки соответствуют 4 группам крови и окрашены в разные цвета:

  • бесцветная – группы 0 (I);
  • синяя (голубая) – группы A (II);
  • красная (розовая) – группы B (III);
  • желтая – группы AB (IV).

Справка. Изогемагглютинирующие сыворотки изготавливают из крови доноров. Они имеют срок годности и должны храниться при температуре 4-8 °С. Сыворотки выпускаются сериями, номер серии отмечают на ампуле. Для анализа берут по две сыворотки каждой группы из разных серий. Это позволяет исключить ошибку в результатах исследования.

Определение группы крови – алгоритм:

  1. На специальную тарелку или стекло наносят капли сывороток
  2. Затем в каждую каплю добавляют кровь пациента.
  3. Тарелку осторожно покачивают, чтобы сыворотки соединились с кровью.
  4. Через 5 минут наблюдают, произошла ли реакция агглютинации («склеивания» эритроцитов): если да, то в пробе образуются зерна или хлопья.
  • При отсутствии реакции агглютинации во всех пробах – группа крови пациента 0 (I).
  • Отсутствие реакции агглютинации в пробе с сывороткой II группы, во всех остальных агглютинация произошла – группа A (II).
  • Отсутствие агглютинации в капле сыворотки III группы – у пациента группа крови B (III).
  • Реакция агглютинации произошла во всех пробах – группа крови AB (IV).

Метод перекрестной реакции

Исследование подразумевает проведение двух анализов: со стандартными сыворотками и со стандартными эритроцитами. Для процедуры с эритроцитами используется сыворотка крови пациента. Ее получают путем центрифугирования биоматериала. Сыворотку подвергают воздействию стандартных эритроцитов.

Справка. Стандартные эритроциты получают из донорской крови групп 0, A и B. Для анализа берется по 2 образца одних и тех же эритроцитов из разных серий.

На тарелку наносят капли сыворотки крови пациента, а рядом с ними – капли стандартных эритроцитов. Тарелку покачивают, чтобы материалы смешались. Затем оценивают результаты:

  • Если агглютинация произошла с эритроцитами групп А и B – группа крови пациента 0.
  • При наличии агглютинации с эритроцитами группы B – группа крови A.
  • Агглютинация с эритроцитами группы А – группа крови B.
  • При отсутствии агглютинации во всех пробах – группа крови AB.

Параллельно с этим исследованием проводят анализ стандартным методом, а затем сравнивают результаты.

Определение группы крови цоликлонами

Определение группы крови с помощью цоликлонов проводится точно так же, как по стандартному методу. Результаты оцениваются тем же образом. Разница лишь в том, что вместо стандартных сывороток применяют цоликлоны анти-А и анти-B – это синтетические сыворотки, содержащие искусственные агглютинины α и β.

Определение резус-фактора

Резус-фактор может определяться с помощью:

  • антирезусной сыворотки (экспресс-метод);
  • цоликлона анти-D супер.

Для исследования с помощью стандартной антирезусной сыворотки могут использовать кровь пациента или эритроциты, полученные из нее. В пробирку капают стандартную антирезусную сыворотку, затем вводят каплю крови пациента или эритроциты. Пробирку вращают в руках, чтобы кровь смешалась с сывороткой. В пробирку также добавляют немного физраствора. Результаты оцениваются по наличию/отсутствию агглютинации:

  • Присутствует – резус положительный.
  • Отсутствует – резус отрицательный.

Анализ с помощью цоликлона анти-D супер проводится на тарелке. На нее наносят реагент, рядом располагают каплю крови. Тарелку покачивают, чтобы материалы соединились. Затем, как и в предыдущем методе, оценивают наличие или отсутствие реакции агглютинации.

Резус-фактор: отрицательный и положительный

Около 85% всех жителей планеты обладают положительным резус-фактором. Наличие или отсутствие антигена D не сказывается на самочувствии и здоровье пациента.

Правила расшифровки результатов

Результаты анализа выдаются пациенту в следующей форме:

  • группа крови (0, А, В, АВ);
  • резус-фактор: Rh+ (положительный) или Rh- (отрицательный).

Результаты анализа на определение группы крови будут актуальными на протяжении всей жизни. Если исследование уже было проведено, повторять его заново не требуется. Группа крови – «постоянная величина» и генетически наследуемый признак, то есть не изменяется в течение жизни. Хотя однажды у юной австралийки Деми Ли-Бреннан поменялась группа крови после пересадки печени. Но данный случай является исключением, и доктора так и не смогли однозначно объяснить этот феномен.

Иногда некоторые пациенты утверждают, что вследствие какого-то заболевания или во время беременности у них изменилась группа крови. Это можно объяснить врачебной ошибкой. И беременность, и некоторые патологии способны затруднять расшифровку результатов анализов, вследствие чего они могут получиться недостоверными. Бывают случаи, что ошибка была допущена при предыдущем исследовании крови.

Читайте также:  Четырнадцатая акушерская неделя беременности: фото животика, питание, анализы и советы врачей для женщины

Б. Определение группы крови с помощью цоликлонов (моноклональных антител)

Используются стандартные наборы моноклональных антител высокой специфичности, содержащие реагенты (цоликлоны) анти-А, анти-В и анти-АВ. Для каждого определения группы крови достаточно применять по одной серии реагентов (цоликлонов) анти-А и анти-В.

На маркированную пластинку капают в три точки, исследуемые эритроциты (0,02 мл). Рядом с ними, под соответ­ствующими надписями, помещают цоликлоны анти-А, анти-В и анти-АВ по одной капле (0,1 мл) в соотношении 1:5. 1:6. После смешивания реагентов и крови стеклянными палочками (уголками предметных стекол), пластинку периодически покачивают, ход реакции наблюдают в течение 3 мин.

Оценка результата проводится по наличию агглютинации эритроцитов с соответствующим реагентом.

Возможны четыре варианта определения результатов:

а) Агглютинация во всех трех каплях цоликлонов – это значит, что исследуемые эритроциты содержат оба антигена (А и В) и кровь принадлежит к группе АВ (IV). В целях исключения панагглютинации, которая может наблюдаться у отдельных больных (миеломная болезнь, ожоговая болезнь), а также в пуповинной крови новорож­денных, в случае установления группы крови АВ (IV) необходимо провести контрольное исследование: одну каплю (0,1 мл) изотонического раствора натрия хлорида смешать с маленькой каплей (0,01 мл) исследуемой крови. Реакция агглютинации должнаотсутствовать.

б) Агглютинация с цоликлонами анти-А и анти-АВ – это означает, что исследуемые эритроциты содержат только антиген А и кровь принадлежит к группе А (II).

в) Агглютинация с цоликлонами анти-В и анти-АВ – это означает, что исследуемые эритроциты содержат только антиген В и кровь принадлежит к группе В (III).

г) Агглютинация отсутствует во всех трех каплях цоликлонов – это значит, что исследуемые эритроциты не содержат антигенов А и В, и кровь принадлежит к группе 0(I).

Оценка результатов определения групп крови при помощи цоликлонов приведена в таблице:

Знаком (+) обозначено наличие агглютинации, знаком (-) ее отсутствие.

При наличии агглютинации со всеми тремя реагентами (цоликлонами) необходимо исключить неспецифическую агглютинацию исследуемых эритроцитов. Для этого, ещё одну каплю эритроцитов смешивают с каплей физиологического раствора. Кровь можно отнести к группе AB(IV) только при отсутствии агглютинации эритроцитов в физиологическом растворе.

Подробные сведения по вопросу «Определение группы крови системы аво цоликлонами»

Цоликлоны изготавливают из водяночной (асцитной) жидкости лабораторных мышей – носителей «анти – А» и «анти – В» гибридом.

Цоликлон «анти – А»(красного цвета) представляет собой раствор антител «анти – А».

Цоликлон «анти – В»(синего цвета) представляет собой раствор «анти – В».

Цоликлон «анти – АВ»(неокрашенный)представляет собой смесь растворов антител «анти – А» и «анти – В» и предназначен для дополнительного контроля группы крови О(I).

Срок хранения– 2 года при температуре +2 ° …+6 °

Вскрытый флакон можно хранитьв закрытом виде при температуре +2 0 …+6 0 в течение 21 дня (дату вскрытия флакона обязательно пишут на его этикетке).

Цоликлоны предназначены дляопределения групп крови человека системы АВ0 в реакциях гемагглютинации, они применяются взамен стандартных иммунных сывороток и параллельно с ними.

Цоликлоны предназначены для выявления в эритроцитах человека антигенов системы АВ0. Анализ может проводиться с кровью, как взятой в консервант, так и без консерванта, а также и с капиллярной кровью, взятой из пальца. Технология изготовления цоликлона исключает возможность его заражения патогенными для человека вирусами.

Определение группы крови проводится в помещении с хорошим освещением при температуре +15 0 …+25 0 на пластинке светлого однотонного цвета с чистой сухой обезжиренной поверхностью (возможно использование планшетов для определения групп крови). Также необходимы:

– одноразовые пастеровские пипетки для нанесения на пластинку капель исследуемой крови;

– палочки стеклянные (предметные стёкла) для смешивания цоликлонов с исследуемой кровью;

-пробирки с исследуемой кровью (в штативе).

Проведение исследования. Оценка результата:

Нанесите на планшет (пластинку) индивидуальными пипетками цоликлоны «анти–А», «анти–В» и «анти–АВ» по одной большой капле (0,1мл) под соответствующими надписями (при использовании неградуированных пипеток, 0,1мл – это одна полная капля).

Рядом с каждой каплей раствора антител нанесите маленькую (0,02мл) каплю исследуемой крови. Соотношение «цоликлон: кровь» соответствует соотношению «5:1». Смешайте каждую каплю цоликлона с каплей крови индивидуальной чистой стеклянной палочкой. Наблюдайте за ходом реакции с цоликлонами, при лёгком покачивании пластинки (планшета). в течение 3 минут. Агглютинация эритроцитов цоликлонами обычно наступает в первые 3–5 секунд, но наблюдение следует вести 3 минут, ввиду более позднего появления агглютинации эритроцитов, содержащих слабые разновидности антигенов АилиВ.

Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным.

Положительный результат выражается в склеивании (агглютинации) эритроцитов. Агглютинаты видны невооружённым глазом в виде мелких красных зёрнышек, песчинок, быстро сливающихся в крупные хлопья, а капля быстро просветляется.

При отрицательной реакции, гемагглютинация не развивается, капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты (зёрнышки, песчинки, хлопья) в ней не обнаруживаются.

Объяснение результатов реакции исследуемой крови с цоликлонами представлено в таблице.

Результаты реакций с цоликлонами

Исследуемая кровь принадлежит к группе

контроль

цоликлон

цоликлон

цоликлон

физраствор

(соответствует сыворотке IV группы)

“анти – А”

(соответствует сыворотке III группы)

“анти – В”

(соответствует сыворотке II группы)

“анти – АВ”

(соответствует сыворотке I группы)

Определение группы крови цоликлонами: как оно проводится?

Определение группы крови и резус-фактора

Алгоритм действий при определении группы крови и резус-фактора
при поступлении женщины в родильный дом

Определение группы крови системы АВ0 моноклональными антителами

Подготовить:

  • сухое предметное стекло (типовую тарелочку) для определения группы крови;
  • цоликлоны анти-А (розового цвета) и анти-В (синего цвета);
  • две пипетки для взятия цоликлонов из флаконов;
  • две стеклянные палочки для смешивания крови пациентки с цоликлонами;
  • одноразовый шприц (на 5-10 мл) с иглой для взятия крови из вены пациентки;
  • в стерильный лоток положить 3 шарика, смоченных спиртом, 2-3 стерильные салфетки;
  • резиновый жгут для внутривенных пункций;
  • сухую центрифужную пробирку, на которой стеклографом отчетливо подписать фамилию пациентки;
  • бланк – направление в лабораторию, где врачом – лаборантом повторно определяется группа крови, резус принадлежность, ставится печать и подпись

Соблюдая все правила для внутривенных пункций, произвести забор крови из вены пациентки (не менее 5 мл).

  • Цоликлоны анти-А и анти-В наносят на планшет или пластинку по одной большой капле (0,1) под соответствующими надписями: анти-А и анти-В.
  • Рядом с каплями антител наносят исследуемую кровь по одной маленькой капле (0,01 мл).
  • После смешивания реагентов и крови разными стеклянными палочками для анти-А и анти-В в соотношении 1:10 за реакцией агглютинации наблюдают в течение 2,5 мин.
  • Чтение результатов через 5 минут при помешивании капель. (от 3-х до 5 минут)
  • Результат оценивается врачом. Оценка результатов реакции агглютинации с Цоликлонами анти-А и анти-В представлена в таблице, в которую также включены результаты определения агглютининов сыворотке (плазме) доноров с помощью стандартных эритроцитов.
Реакция исследуемых эритроцитов с цоликлонамиИсследуемая кровь принадлежит к группе
анти-Аанти-В
0(I)
+A(II)
+B(III)
++AB(IV)

С целью исключения аутоагглютинации, которая может наблюдаться в пуповинной крови новорожденных, в случае установления группы крови АВ(IV) необходимо произвести контрольное исследование: одну каплю (0,1 мл) изотонического раствора хлористого натрия смешать с маленькой каплей (0,01 мл) исследуемой крови. Реакция агглютинации должна ОТСУТСТВОВАТЬ.

А.Внимательно заполнить все графы бланка – направления в лабораторию для определения группы крови и резус принадлежности с подписью врача.

В. Доставить бланк-направление и пробирку с кровью пациентки в лабораторию для тщательного определения группы крови и резус принадлежности пациентки.

Определение резус-фактора с помощью моноклонального реагента (Цоликлон анти-D Супер)

На тарелку наносят большую каплю реагента (около 0,1 мл). Рядом помещают маленькую каплю (0,01-0,05 мл) исследуемой крови и смешивают кровь с реагентом. Реакция агглютинации начинает развиваться через 10-15 сек, четко выраженная агглютинация наступает через 30-60 сек. (резус положительная, нет агглютинации – резус отрицательная). Результаты реакции учитывают через 3 мин.

Тарелку после смешивания реагента с кровью рекомендуется покачивать не сразу, а через 20-30 сек, что позволяет за это время развиться более полной крупнолепестковой агглютинации.

Экспресс-определение групп крови АВО и резус с использованием набора “Эритротест-группокарт”

Набор “Эритротест-группокарт” (ООО “Гематолог”, Москва) предназначен для определения АВО и Резус (RhD) групп крови человека в лабораторных и полевых условиях. Определение проводится в реакции прямой гемагглютинации и не требует никаких вспомогательных реактивов и оборудования. В состав набора входят:

  • карточка “Эритротест-группокарт”;
  • пипетка с дозированным объемом капли около 0,02 мл;
  • стерильно упакованный скарификатор;
  • палочка для смешивания крови с реагентом.

В лунках карточки находятся высушенные моноклональные реагенты анти-А, анти-В, анти-АВ и анти-D, которые немедленно растворяются при добавлении воды. Моноклональные анти-D-антитела специфично выявляют антиген RhD независимо от группы АВО. В последней лунке находится растворитель для постановки контроля на неспецифическую аутоагглютинацию.

Определение производят в нативной крови с консервантом, в крови без консерванта или крови, взятой из пальца.

  • Вскрывают упаковку и достают карточку, не дотрагиваясь до лунок с рабочей поверхностью. Вписывают данные пациента, кроме группы крови.
  • В каждую лунку вносят 1 каплю воды (водопроводной или дистиллированной), используя вложенную в набор пипетку. Воду наносят на пятно высушенного реагента. Нельзя допускать подсыхания капли.
  • Вносят в каждую лунку маленькую каплю исследуемой крови. Кровь наносят рядом с каплей реагента, не касаясь его, чтобы избежать загрязнения одного реагента другим. Для взятия крови из пальца используют стерильный скарификатор.
  • Тщательно смешивают кровь с реагентом с помощью палочки, вложенной в набор. В каждой лунке смешивание производят только новой палочкой. Использование одной палочки для перемешивания в разных лунках не допустимо, т. к. ведет к загрязнению реагентов и ошибочному определению группы крови.
  • Сразу покачивают пластинку. Четкая агглютинация наступает через 10-30 с, однако окончательный результат следует учитывать через 3 мин, т.к. в случае слабых форм антигена А реакция наступает позднее, а агглютинаты мельче.
  • Результат оценивают визуально (табл. 18.6). В квадраты под каждой лункой вписывают результат реакции с соответствующим реагентом (+ или -).

Таблица 18.6. Результаты реакции в наборе “Эритротест-группокарт” и группа крови
Анти-ААнти-ВАнти-АВАнти-ОГруппа крови
0(I) Rh – отриц.
+0(I) Rh – полож.
++А(II) Rh – отриц.
+++А(II) Rh – полож.
++В(III) Rh – отриц.
+++В(III) Rh – полож.
+++АВ(IV)Rh – отриц.
++++АВ(IV) Rh – полож.
  • Вписывают группу крови. Заключение о группе крови можно делать только в случае отсутствия реакции в контроле (последняя лунка).
  • Отрезают по линии лунки с кровью, а карточку сохраняют.
  • Срок хранения набора “Эритротест-группокарт” – 2 года при температуре 2- 8°С. Допускается хранение в течение 1 года без холодильника, если температура не превышает 25°С. Хранение и использование незапаянных или поврежденных пакетов не допускается.

    Цоликлоны для определения группы крови

    • Что такое цоликлоны?
    • Процедура определения группы крови
    • Расшифровка результатов
    • Определение резус-фактора
    • Полезные советы
    • Видео по теме

    Определение группы крови по цоликлонам — это простая процедура, которая проводится в лабораторных условиях. В ее основе лежит химическая реакция между моноклональными сыворотками и агглютиногенами. В результате можно узнать не только группу крови, но и ее резус-фактор, и эти методики считаются наиболее простыми, точными и доступными. Вещества продаются в удобных флаконах разного объема и оснащены дозатором-капельницей. Проведение анализа занимает несколько минут, благодаря чему в лабораториях можно в течение дня обработать огромное количество проб.

    Что такое цоликлоны?

    Цоликоны — это моноклональные антитела, которые находятся в солевом растворе. Вещество получило свое название в честь его изобретателей — Центральный Ордена Ленина Институт, сегодня переименованный в Гематологический научный центр. Они представлены жидкостью, которая продается во флаконах объемом 5 и 10 мл. Это универсальный реагент для гематологических исследований, поскольку позволяет определить группу крови как в системе АВ0, так в системе резус.

    Выделяют 3 основные разновидности цоликлонов:

    • анти-А — жидкость красного цвета;
    • анти-В — синее вещество;
    • анти-D — прозрачный реагент для определения резус-фактора.

    Для определения группы крови применяются цоликлоны анти-А и анти-В. Они вступают в биохимические реакции с агглютиногенами, которые расположены на поверхности эритроцитов — красных кровяных клеток. Эритроциты группы крови А содержат агглютиноген А, который прореагирует с цоликлоном анти-А. Аналогично определяется содержание агглютингена В. Положительным результатом реакции считается склеивание эритроцитов и выпадение их в осадок.

    Процедура определения группы крови

    Процедура, как определить группу крови с помощью цоликлонов, очень проста и проводится за несколько минут. Для нее потребуется нативная («живая») капиллярная кровь, допускается наличие в ней консерванта. Также понадобится планшет — плоская поверхность из стекла, на которой будет происходить реакция. Процедуру проводят по определенному алгоритму:

    1. нанести две большие капли цоликлонов на поверхность планшета (обычно реагент анти-А находится слева, а анти-В — справа);
    2. добавить небольшие капли крови, которые по объему будут в 10 раз меньше реагентов;
    3. аккуратно двигать планшет, чтобы кровь смешалась с раствором, но две капли не соединились друг с другом;
    4. через несколько минут наблюдать результаты.

    Для установления группы подойдет и кровь с добавлением консерванта. Однако простота методики позволяет проводить ее на месте непосредственно после взятия биологического материала. Достаточно набрать небольшое количество капиллярной крови из пальца, чтобы ее полностью хватило для проведения анализа.

    Расшифровка результатов

    Спустя несколько минут после соединения реагентов можно наблюдать результаты. Полное смешивание жидкостей говорит об отсутствии реакции, а агглютинация проявляется появлением красных сгустков в прозрачном растворе. Это эритроциты, которые склеиваются между собой при контакте с несовместимыми моноклональными антителами. Далее можно расшифровать результаты по простому алгоритму:

    • 1 группа (0) — агглютинация отсутствует в обеих каплях, поскольку на эритроцитах отсутствуют агглютиногены;
    • 2 группа (А) — реакция наблюдается в первой капле с цоликлоном анти-А;
    • 3 группа (В) — во второй капле происходит склеивание эритроцитов при контакте с реагентом анти-В;
    • 4 группа (АВ) — появление красного осадка в обеих каплях.

    Четвертая группа крови считается самой редкой, поэтому при появлении агглютинации в обеих лунках анализ проводится повторно. Кроме того, кровь необходимо добавить в обычный физиологический раствор, чтобы исключить вероятность опасных заболеваний. У здорового человека она никак не прореагирует с физраствором, а эритроциты не будут склеиваться.

    Определение резус-фактора

    Для определения резус-фактора понадобится цоликлон анти- D. Он представлен бесцветной жидкостью и также продается в небольших флаконах с дозатором. Чтобы провести реакцию, достаточно одной дополнительной капли крови, которую помещают на планшете отдельно. Процедура проводится по следующей схеме:

    1. нанести каплю цоликлона анти- D объемом 0,1 мл на стекло;
    2. рядом добавить каплю крови, объем которой составляет 0,01 мл;
    3. стеклянной палочкой соединить две жидкости и аккуратно шевелить стекло, чтобы кровь перемешивалась и реагентом;
    4. спустя 3 минуты зафиксировать результат.

    Первые результаты могут просматриваться через 15 секунд, но для установления окончательного результата важно подождать 3 минуты. Наличие результата, то есть появление реакции агглютинации, говорит о том, что резус-фактор положительный, его отсутствие свидетельствует об отрицательном резусе.

    Читайте также:  Настойка золотого уса на водке – рецепты домашнего приготовления

    Полезные советы

    Определение группы и резус-фактора крови с использованием цоликлонов считается одним из самых простых и доступных методов, поэтому широко применяется в лабораториях разного уровня. Кроме того, такой анализ дает достоверные результаты. Однако в некоторых случаях они бывают ложными, а причиной этому становится несоблюдение нескольких правил. Простая инструкция по применению цоликлонов и работа с ними позволит избежать получения недостоверных результатов и необходимости проводить исследование заново:

    • хранить реагенты в холодильнике, при температуре от 2 до 8 градусов, а распечатанный флакон использовать в течение 30 суток;
    • исследования проводятся при комнатной температуре, а в слишком жарком помещении рекомендуется периодически охлаждать стеклянную поверхность планшета;
    • обозначать на планшете разные цоликлоны маркером, поскольку их цвет после добавления крови быстро исчезает;
    • соблюдать правильные пропорции реагентов: если крови будет слишком много, реакция агглютинации эритроцитов будет мало выражена;
    • не допускать смешивания капель жидкости, в которых уже присутствуют разные типы цолкиклонов — в таком случае реакцию придется проводить заново;
    • обозначать окончательный результат не менее, чем через 3 минуты после начала реакции.

    Важно также соблюдать последовательность действий во время анализа. Так, если стеклянную поверхность не раскачивать, даже при отсутствии реакции склеивания эритроциты будут расположены в краевой зоне капли. Это может стать причиной неправильной интерпретации результатов. При определении группы крови необходимо учитывать острые и хронические заболевания, которые наблюдаются у пациента. При патологиях печени и органов кроветворной системы, а также болезнях, которые протекают по типу сепсиса, может происходить явление патагглютинации. Эритроциты будут склеиваться даже при контакте с обычным физиологическим раствором. Напротив, при лейкозе кровяные клетки не отреагируют на присутствие антител, и агглютинация не произойдет.

    Цоликлоны — это важные реагенты, которые используются ежедневно в гематологических лабораториях. Они позволяют быстро и безошибочно определить группу крови и ее резус без дополнительного оборудования и специальных навыков. Однако важно выполнять простой алгоритм, чтобы результаты анализа действительно были достоверными.

    Определение группы крови цоликлонами: как оно проводится?

    Зарегистрировано в Минюсте России 12 ноября 2020 г. N 60868

    МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

    от 20 октября 2020 г. N 1134н

    ОБ УТВЕРЖДЕНИИ ПОРЯДКА

    МЕДИЦИНСКОГО ОБСЛЕДОВАНИЯ РЕЦИПИЕНТА, ПРОВЕДЕНИЯ ПРОБ

    НА ИНДИВИДУАЛЬНУЮ СОВМЕСТИМОСТЬ, ВКЛЮЧАЯ БИОЛОГИЧЕСКУЮ

    ПРОБУ, ПРИ ТРАНСФУЗИИ ДОНОРСКОЙ КРОВИ

    И (ИЛИ) ЕЕ КОМПОНЕНТОВ

    В соответствии с пунктом 78 Правил заготовки, хранения, транспортировки и клинического использования донорской крови и ее компонентов, утвержденных постановлением Правительства Российской Федерации от 22 июня 2019 г. N 797 (Собрание законодательства Российской Федерации, 2019, N 27, ст. 3574), приказываю:

    1. Утвердить порядок медицинского обследования реципиента, проведения проб на индивидуальную совместимость, включая биологическую пробу, при трансфузии донорской крови и (или) ее компонентов согласно приложению.

    2. Настоящий приказ вступает в силу 1 января 2021 г. и действует до 1 января 2027 г.

    приказом Министерства здравоохранения

    от 20 октября 2020 г. N 1134н

    МЕДИЦИНСКОГО ОБСЛЕДОВАНИЯ РЕЦИПИЕНТА, ПРОВЕДЕНИЯ ПРОБ

    НА ИНДИВИДУАЛЬНУЮ СОВМЕСТИМОСТЬ, ВКЛЮЧАЯ БИОЛОГИЧЕСКУЮ

    ПРОБУ, ПРИ ТРАНСФУЗИИ ДОНОРСКОЙ КРОВИ

    И (ИЛИ) ЕЕ КОМПОНЕНТОВ

    1. Настоящий порядок устанавливает правила проведения медицинского обследования реципиента, проведения проб на индивидуальную совместимость, включая биологическую пробу, при трансфузии донорской крови и (или) ее компонентов, с целью обеспечения эффективности и безопасности трансфузии (переливания) донорской крови и (или) ее компонентов (далее – медицинское обследование).

    2. Медицинское обследование реципиента проводится в медицинских организациях, образовательных организациях, научных организациях, осуществляющих оказание медицинской помощи, независимо от организационно-правовой формы и формы собственности, а также организациях федеральных органов исполнительной власти, в которых федеральным законом предусмотрена военная и приравненная к ней служба (далее – медицинские организации), осуществляющих клиническое использование донорской крови и (или) ее компонентов .

    Статья 16 Федерального закона от 20 июля 2012 г. N 125-ФЗ “О донорстве крови и ее компонентов” (Собрание законодательства Российской Федерации, 2012, N 30, ст. 4176, 2018, N 1, ст. 41) (далее – Федеральный закон N 125-ФЗ).

    3. Проведение индивидуального подбора компонентов донорской крови, исследование аллоиммунных антител у реципиента осуществляется в медицинских организациях, а также в организациях, входящих в службу крови субъектов обращения донорской крови, осуществляющих заготовку и хранение донорской крови и (или) ее компонентов (далее – организации службы крови).

    Часть 1 статьи 15 Федерального закона N 125-ФЗ (Собрание законодательства Российской Федерации, 2012, N 30, ст. 4176).

    4. Медицинское обследование осуществляется при наличии информированного добровольного согласия реципиента на трансфузию (переливание) донорской крови и ее компонентов с соблюдением требований, установленных статьей 20 Федерального закона от 21 ноября 2011 г. N 323-ФЗ “Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации” .

    Собрание законодательства Российской Федерации, 2011, N 48, ст. 6724, 2019, N 10, ст. 888.

    5. Медицинское обследование проводится пациентам, поступившим для оказания медицинской помощи по профилю акушерское дело, акушерство и гинекология, аллергология и иммунология, анестезиология и реаниматология, гастроэнтерология, гематология, гериатрия, детская кардиология, детская онкология, детская урология-андрология, детская хирургия, инфекционные болезни, кардиология, колопроктология, нейрохирургия, неонатология, нефрология, онкология, паллиативная медицинская помощь, педиатрия, пластическая хирургия, пульмонология, радиология, радиотерапия, сердечно-сосудистая хирургия, терапия, токсикология, торакальная хирургия, травматология и ортопедия, трансплантация костного мозга и гемопоэтических стволовых клеток, урология, фтизиатрия, хирургия, хирургия (абдоминальная), хирургия (комбустиология), хирургия (трансплантация органов и (или) тканей), челюстно-лицевая хирургия.

    6. Медицинское обследование пациента, поступившего в медицинскую организацию, которому планируется выполнение трансфузий (переливаний), организуется в отделении врачом-трансфузиологом, лечащим врачом либо дежурным врачом, которые прошли обучение по вопросам трансфузиологии (далее – врач, проводящий трансфузию), и включает в себя:

    сбор анамнеза, включая оценку факторов риска возникновения посттрансфузионных реакций и осложнений (повторные трансфузии (переливания) донорской крови и (или) ее компонентов, повторные беременности, ранее выявленные аллоиммунные антитела, посттрансфузионные реакции и осложнения);

    первичное определение группы крови по системе AB0 и резус- принадлежности с внесением результатов в медицинскую документацию реципиента;

    направление образца крови реципиента в лабораторию для подтверждающего исследования.

    7. Пробы крови реципиента для определения совместимости и проведения индивидуального подбора берутся не ранее чем за 24 часа до трансфузии и маркируются с указанием даты, фамилии и инициалов реципиента, наименования отделения, AB0 и резус-принадлежности реципиента.

    8. Не допускается открытие проб с образцами крови реципиента до момента доставки их на исследование в лабораторию.

    9. Транспортировка в лабораторию проб с образцами крови реципиента осуществляется в специальных контейнерах при температуре от +-2 .C до +24 .C при условии недопущения прямого воздействия света.

    10. Хранение и подготовка к лабораторному исследованию проб крови реципиента до проведения лабораторных исследований осуществляется в условиях, отвечающих требованиям, установленным в инструкциях производителя набора реагентов.

    11. Исследование образцов крови реципиента организуется в лаборатории медицинской организации и включает в себя:

    подтверждающее определение группы крови по системе AB0 перекрестным методом с использованием реагентов, содержащих анти-A, анти-B антитела и стандартные эритроциты;

    определение группы крови по системе AB0 новорожденным детям осуществляется из периферической крови, прямым методом с использованием реагентов, содержащих анти-A, анти-B антитела;

    в случае расхождения результатов прямого и обратного определения (выявление экстраагглютинина анти-A1) группы крови по системе AB0 для подтверждения подгруппы A2 или A2B используют реактив анти-A1;

    подтверждающее определение резус-принадлежности с использованием реагентов, содержащих анти-D IgM. В случае расхождения результатов исследования, полученных в разных медицинских организациях, а также при исследовании резус-принадлежности у беременных женщин, определяется наличие вариантов антигена D с использованием реактива анти-D IgG;

    определение антигена эритроцитов K1 системы Kell (далее – антиген K);

    определение антигенов эритроцитов C, c, E, e лицам женского пола в возрасте до 18 лет и женщинам детородного возраста, реципиентам, которым показаны повторные трансфузии, реципиентам, у которых когда-либо выявлялись аллоиммунные антитела, а также реципиентам, у которых в анамнезе отмечены несовместимые трансфузии;

    скрининг аллоиммунных антител к антигенам эритроцитов с использованием панели стандартных эритроцитов, состоящей не менее чем из 3 видов клеток, типированных по антигенам C, c, E, e, K, Кидд, Даффи, Лютеран, MNS, Левис. Скрининг проводится в непрямом антиглобулиновом тесте. В каждую серию исследований включаются “положительный” и “отрицательный” контроли (образцы сывороток, содержащие и не содержащие антитела). Не допускается применение смеси (пула) образцов эритроцитов для скрининга аллоиммунных антител;

    при отсутствии аллоиммунных антител в плазме матери или новорожденного ребенка и при отрицательном результате прямой пробы Кумбса с эритроцитами ребенка пробы на совместимость перед трансфузией новорожденному не проводятся.

    12. При совпадении результатов определения антигенов эритроцитов C, c, E, e, антигена K, проведенных дважды в одной медицинской организации, антигены эритроцитов C, c, E, e, антигена K реципиента считаются установленными и в дальнейшем не определяются.

    13. Реципиентам, у которых при скрининге не были выявлены аллоиммунные антитела, проводят трансфузии эритроцитсодержащих компонентов донорской крови, совместимых с образцом крови реципиента по антигенам AB0, резус-принадлежности и антигена K.

    При трансфузиях эритроцитсодержащих компонентов донорской крови лицам женского пола в возрасте до 18 лет и женщинам детородного возраста, реципиентам, которым показаны повторные трансфузии, реципиентам, у которых когда-либо выявлялись аллоиммунные антитела, а также реципиентам, у которых в анамнезе отмечены несовместимые трансфузии, дополнительно учитывают совместимость донора и реципиента по антигенам эритроцитов C, c, E, e.

    14. При выявлении у реципиента аллоиммунных антител осуществляется:

    а) идентификация аллоиммунных антител с панелью типированных эритроцитов, содержащей не менее 10 образцов клеток;

    б) определение антигенов эритроцитов C, c, E, e, а также, в случае необходимости: систем Кидд, Даффи, Лютеран, MNS, Левис и других систем с помощью антител соответствующей специфичности;

    в) использование для трансфузии эритроцитсодержащих компонентов донорской крови, не содержащих антигенов, против которых направлены аллоиммунные антитела;

    г) проведение пробы на совместимость с использованием непрямого антиглобулинового теста.

    15. Результаты исследований, указанные в пунктах 11 и 14 настоящего порядка, вносятся в медицинскую документацию реципиента.

    16. При планировании трансфузии эритроцитсодержащих компонентов донорской крови реципиентам с выявленными аллоиммунными антителами врач, проводящий трансфузию, направляет образцы крови реципиента в лабораторию для проведения индивидуального подбора.

    17. Индивидуальный подбор эритроцитсодержащих компонентов включает в себя пробу на совместимость эритроцитсодержащих компонентов донора с образцом крови реципиента, проведенную с использованием непрямого антиглобулинового теста.

    18. Единица эритроцитсодержащего компонента крови маркируется “совмещено для реципиента” с указанием даты индивидуального подбора, фамилии и инициалов реципиента, наименования отделения медицинской организации.

    19. Перед переливанием эритроцитсодержащих компонентов донорской крови реципиентам без аллоиммунных антител, а также перед трансфузией по индивидуальному подбору, врач, проводящий трансфузию, выполняет контрольную проверку AB0 и резус-принадлежности реципиента и донора, а также пробу на индивидуальную совместимость образца крови реципиента с эритроцитами донора методом исследования на плоскости. Трансфузии осуществляются с учетом требований к совместимости приложения к настоящему порядку.

    20. В целях трансфузии концентратов донорских тромбоцитов, плазмы, криопреципитата и гранулоцитного концентрата врач, проводящий трансфузию, определяет группу крови реципиента по системе AB0. Проба на индивидуальную совместимость методом исследования на плоскости при комнатной температуре не проводится.

    21. Индивидуальный подбор тромбоцитов рекомендуется осуществлять в случае, если ранее реципиенту осуществлялись две и более последовательные трансфузии концентратов тромбоцитов без наличия клинического эффекта или с повторными реакциями и осложнениями у реципиентов.

    22. Индивидуальный подбор тромбоцитов выполняется с учетом наличия у реципиента антител к тромбоцитам (анти-HLA I класса, анти-HPA).

    23. Биологическая проба проводится независимо от объема и наименования донорской крови и ее компонентов, за исключением трансфузии криопреципитата. При необходимости трансфузии нескольких единиц компонентов донорской крови биологическая проба выполняется перед трансфузией каждой новой единицы компонента донорской крови. Биологическая проба выполняется, в том числе, при экстренной трансфузии. Для проведения биологической пробы донорскую кровь и (или) ее компоненты переливают со скоростью 2 мл в минуту первые 15 минут трансфузии, наблюдая за состоянием реципиента.

    24. При появлении во время проведения биологической пробы клинических симптомов: озноб, боль в пояснице, чувство жара и стеснения в груди, головная боль, тошнота или рвота, врач, проводящий трансфузию, немедленно ее прекращает.

    25. При проведении трансфузии донорской крови и ее компонентов под наркозом признаками реакции или осложнения служат усиливающаяся без видимых причин кровоточивость в операционной ране, снижение артериального давления, учащение пульса, изменение цвета мочи. При выявлении любого из перечисленных симптомов трансфузия прекращается.

    26. После окончания трансфузии дважды в течение 2 часов осуществляется контроль температуры тела, артериального давления, пульса, диуреза и цвета мочи реципиента.

    27. Информация о медицинском обследовании реципиента, выполнении проб на индивидуальную совместимость, трансфузии вносится в протокол трансфузии и медицинскую документацию реципиента.

    28. Пробирка с кровью реципиента, использованная для проведения проб на индивидуальную совместимость, единица компонента донорской крови с остаточным объемом не менее 5 мл, образец крови реципиента, использованный для индивидуального подбора (при наличии), хранятся в отделении, осуществившем трансфузию, в течение 48 часов при температуре 2 – 6 .C для возможного определения причин реакций и осложнений, связанных с трансфузией.

    29. В случае возникновения гемолитического осложнения после трансфузии эритроцитсодержащих компонентов донорской крови врач, осуществляющий трансфузию, направляет образцы крови реципиента, использованные для проб на индивидуальную совместимость, единицу компонента донорской крови с остаточным объемом не менее 5 мл, а также образец крови реципиента, взятый после трансфузии, в лабораторию для лабораторного исследования.

    30. В случае возникновения гемолитического осложнения после трансфузии эритроцитсодержащих компонентов донорской крови организуется выяснение причин гемолитического осложнения, включающее в себя определение:

    аллоиммунных антител у реципиента и их идентификацию с использованием панели типированных эритроцитов, содержащей не менее 10 образцов клеток;

    антигенов эритроцитов реципиента C, c, E, e и других систем (Кидд, Даффи, Лютеран, MNS, Левис и другие);

    аллоиммунных антител у донора, в случае трансфузии компонентов донорской крови, содержащих плазму, и их идентификацию с использованием панели типированных эритроцитов, содержащей не менее 10 образцов клеток;

    прямого антиглобулинового теста, выполненного в образцах крови реципиента, взятых до и после трансфузии.

    Для уточнения причин гемолиза осуществляется также определение антиэритроцитарных аутоантител и холодовых антител, которые, в случае наличия у реципиента в высоком титре и при отсутствии выявленных причин посттрансфузионного гемолитического осложнения, учитываются в качестве причины гемолиза, не связанной с трансфузией несовместимых донорской крови и (или) ее компонентов.

    31. Результаты лабораторного исследования причин гемолитического осложнения после трансфузии вносятся в медицинскую документацию реципиента.

    32. В целях обеспечения качества оказания медицинской помощи по профилю “трансфузиология” осуществляется прослеживаемость данных о медицинском обследовании реципиента, выполнении проб на индивидуальную совместимость, трансфузиях, исполнителях работ.

    к порядку медицинского обследования

    реципиента, проведения проб

    на индивидуальную совместимость,

    включая биологическую пробу,

    при трансфузии донорской

    крови и (или) ее компонентов

    от 20 октября 2020 г. N 1134н

    КОМПОНЕНТОВ ДОНОРСКОЙ КРОВИ С ОБРАЗЦОМ КРОВИ РЕЦИПИЕНТА

    ПО СИСТЕМЕ AB0 И РЕЗУС-ПРИНАДЛЕЖНОСТИ ПРИ ТРАНСФУЗИЯХ

    ДОНОРСКОЙ КРОВИ И ЕЕ КОМПОНЕНТОВ

    AB0 принадлежность реципиента

    AB0 принадлежность донора

    эритроцитсодержащего компонента (ЭСК)

    концентрата тромбоцитов в добавочном растворе

    Ссылка на основную публикацию